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維生素檢驗(yàn)之串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)
發(fā)布時(shí)間:2017-02-04 15:05:47 | 瀏覽次數(shù):


知識(shí)背景 

自二胎政策放開(kāi)以來(lái),,包括高齡產(chǎn)婦在內(nèi)的孕產(chǎn)婦隊(duì)伍不斷壯大,,每個(gè)家庭追求高質(zhì)量生育的要求越來(lái)越強(qiáng)烈:孕期不錯(cuò)過(guò)任何一項(xiàng)醫(yī)院開(kāi)展的檢驗(yàn)檢查,,如唐氏篩查,、彩超畸形篩查,、妊娠期糖尿病篩查(OGTT 實(shí)驗(yàn)),、TORCH 篩查,、遺傳性耳聾基因檢測(cè)、孕晚期每周一次的胎心監(jiān)護(hù)等等,,孕婦經(jīng)常在做完檢查后會(huì)問(wèn)醫(yī)生:“還有沒(méi)有應(yīng)該查的項(xiàng)目,?”。其實(shí)孕產(chǎn)婦也應(yīng)該進(jìn)行維生素檢測(cè),。

現(xiàn)狀及意義 

談到維生素,,大家可能對(duì)其重視程度不夠,但維生素確實(shí)和我們的健康關(guān)系十分密切,,一個(gè)簡(jiǎn)單的經(jīng)歷可以讓我們重視維生素檢測(cè)的意義:出生2個(gè)月的嬰兒,,出現(xiàn)哮喘癥狀,很多人會(huì)首先想到是否因?yàn)楦腥疽鸬闹夤苎谆蚍窝椎鹊?,使用了多種藥物后,,仍不見(jiàn)起色,,結(jié)果竟是由于缺鈣引起的,,眾所周知缺鈣是由于維生素 D 缺乏導(dǎo)致的,可見(jiàn)維生素檢驗(yàn)意義重大,。

維生素是人體的重要生命元素,。維生素種類(lèi)很多,包括維生素 B1(硫胺素),、維生素 B2(核黃素),、維生素 B3(煙酸)、維生素 B12,、維生素 A,、維生素 D、維生素 E,、維生素 K 等等,。本文以維生素 D 為例,說(shuō)明維生素檢測(cè)在孕產(chǎn)婦及新生兒人群中的意義,。

維生素 D 缺乏會(huì)導(dǎo)致佝僂病等骨科疾病最為熟知,,然而孕婦維生素 D  缺乏帶來(lái)的疾病隱患同樣不容小覷。由于產(chǎn)前孕婦多缺乏戶(hù)外活動(dòng),,接受日照時(shí)間少,,加之妊娠期胎兒生長(zhǎng)發(fā)育需要以及雙胎等因素的影響,很多孕婦在妊娠期間會(huì)出現(xiàn)維生素 D 不足的現(xiàn)象,。

維生素 D 在人體內(nèi)參與多條代謝代謝途徑:如鈣 - 磷代謝,。維生素 D 缺乏會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的后果,,特別對(duì)于妊娠期女性而言會(huì)導(dǎo)致:新生兒延遲性低血鈣、增加后代早年Ⅰ型糖尿病,、嬰兒期變態(tài)反應(yīng)性疾病,、嬰兒下呼吸道合胞病毒感染、一定程度加大兒童語(yǔ)言障礙發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)等等,,有最新的研究表明維生素 D 缺乏會(huì)導(dǎo)致心臟病,、糖尿病、自身免疫性疾病,、幾種類(lèi)型的腫瘤,。有研究還表明,在妊娠早期,,若維生素 D 濃度 < 37.5 nmol/L(即 15 ng/mL),,孕婦患妊娠高血壓幾率會(huì)增加5倍。
    25(OH)D 是機(jī)體維生素 D  的主要儲(chǔ)存形式,,占總量的 95% 以上,,由于其半衰期長(zhǎng)(2~3 周),并且不受血鈣和甲狀旁腺激素激素的影響,,因此被公認(rèn)是客觀評(píng)價(jià)維生素營(yíng)養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo),。

在臨床工作中應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下幾個(gè)話(huà)題:對(duì)于妊娠糖尿病患者普遍存在維生素 D  缺乏,并且維生素 D  缺乏是導(dǎo)致胰島素抵抗的重要原因之一,,及時(shí)檢測(cè) 25(OH)D3 濃度,,采取相應(yīng)措施,對(duì)防治妊娠糖尿病具有一定的意義,,臨床上可以通過(guò)調(diào)節(jié)維生素D水平對(duì)妊娠期糖尿病的發(fā)病或血糖水平進(jìn)行干預(yù),。 

大量的動(dòng)物和人群研究表明維生素D在免疫系統(tǒng)、肺器官發(fā)育以及抗炎方面的作用,。對(duì)于哮喘患兒,,補(bǔ)充維生素 D  可以增加地塞米松對(duì)于哮喘的免疫調(diào)節(jié)作用。孕期維生素D與剖宮產(chǎn),、死產(chǎn),、孕婦陰道感染、牙周炎,、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育異常等不良妊娠結(jié)局有關(guān),。因此,將維生素D納入產(chǎn)前篩查的項(xiàng)目是一項(xiàng)關(guān)鍵性的工作,。 

《維生素D缺乏性佝僂病防治建議》中指出:如有條件孕婦,,妊娠3個(gè)月應(yīng)檢測(cè)血液維生素D濃度。如果出現(xiàn)維生素D缺乏現(xiàn)象,,可以適當(dāng)補(bǔ)充維生素D制劑改善并維持到正常水平,。美國(guó)內(nèi)分泌學(xué)會(huì) 2011 年發(fā)布的《維生素D缺乏評(píng)估,、治療和預(yù)防的臨床實(shí)踐指南》認(rèn)為,外周血血清 25- 羥維生素D水平 < 20 ng/mL 者應(yīng)被診斷為維生素D缺乏,。維生素D對(duì)于人體的意義重大,,因此開(kāi)展孕期檢測(cè)極其關(guān)鍵。

技術(shù)手段 

通過(guò)維生素D檢測(cè)的意義,,可知多種維生素檢測(cè)在孕產(chǎn)婦和新生兒中意義重大,。由于部分維生素穩(wěn)定性較差,如何準(zhǔn)確檢測(cè)維生素水平,,就顯得尤為重要,,這也成為維生素檢驗(yàn)討論的焦點(diǎn)話(huà)題。其中在臨床檢驗(yàn)和臨床實(shí)踐中存在的一個(gè)主要問(wèn)題:準(zhǔn)確度和精密度的問(wèn)題,,此外還需具備良好靈敏度正確識(shí)別維生素D高度缺乏患者,。

目前,在臨床檢驗(yàn)中主要的檢測(cè)方法有:液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS),、羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫分析法,。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)溯源聯(lián)合委員會(huì)將 LC-MS/MS 認(rèn)為維生素D檢測(cè)的「金標(biāo)準(zhǔn)」,質(zhì)譜法是使用脫水離子作為母離子,,重現(xiàn)性與準(zhǔn)確度較高,。 

串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是檢驗(yàn)領(lǐng)域一項(xiàng)用途廣泛的技術(shù),其檢測(cè)范圍寬,、能檢測(cè)樣本中極微量的物質(zhì)濃度,。檢測(cè)標(biāo)本可以是孕產(chǎn)婦血清樣本,、臍帶血清樣本,,通過(guò)離心、去蛋白,、加內(nèi)標(biāo)等環(huán)節(jié)上機(jī)檢測(cè),,分析方法包括定量和半定量?jī)煞N方法。 

由于血液中含有大量的纖維蛋白,,加之串聯(lián)質(zhì)譜儀管路極細(xì),,做好進(jìn)樣針、管路,、噴霧針的清洗,,對(duì)保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性非常關(guān)鍵。 

在檢測(cè)過(guò)程中還要保證充足的試劑耗材供應(yīng):高純度的氮?dú)?、色譜級(jí)甲醇(或者一定比例的甲醇水,,用來(lái)沖洗管路)、流動(dòng)相等等,。作為實(shí)驗(yàn)人員要密切關(guān)注儀器運(yùn)行狀態(tài),,確保液相和質(zhì)譜能夠處于最佳實(shí)驗(yàn)狀態(tài),,還要關(guān)注樣本檢測(cè)峰形的好壞。

維生素缺乏將嚴(yán)重影響孕產(chǎn)婦和嬰幼兒健康,。因此,,為確保母嬰健康,維生素篩查非常關(guān)鍵,,做到早發(fā)現(xiàn),、早治療。身為檢驗(yàn)人員,,應(yīng)不斷總結(jié)學(xué)習(xí),,保證維生素檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,配合臨床醫(yī)生,,把孕產(chǎn)婦及嬰幼兒維生素檢測(cè)這項(xiàng)工作做好,。